沙门氏菌病是由沙门氏菌引起的疾病,主要是败血症和肠炎。由于它能感染人、多种家畜和野生动物,在公共卫生科学中具有重要的研究地位。2015年6月,我院接诊一例虎皮鹦鹉猝死出血病例,经沙门氏菌PCR快速鉴定为沙门氏菌感染。

在尸体解剖之前。

在尸体解剖之前。

1发病和死亡的过程。

宠物主人来到医院要求鉴定鹦鹉的死因,描述了虎皮鹦鹉的突然死亡,并用肉眼观察到鹦鹉的肛门处只有大量带血的大便。解剖观察发现肝脏呈脆性,有片状黄色坏死灶。胰腺轻度出血;肾脆;十二指肠后端和盲肠严重出血;其他器官正常。检查寄生虫以消除球虫。

大量血便。

2细菌分离。

无菌采集死亡鹦鹉的肝、脾组织,接种于血平板,37℃培养18 ~ 24后观察。从肝脏中分离出溶血性小菌落,接种于麦康凯平板上生长出无色透明的菌落,再接种于亚硫酸铋平板上,获得具有金属光泽的黑色菌落。经革兰氏染色,该菌株为阴性杆菌,初步判断为沙门氏菌。

死亡打印尸检图。

3 PCR鉴定。

3.1细菌DNA摄取。

采用热裂解法提取细菌DNA,即将150μl检测菌液、沙门氏菌标准菌株菌液和水(阴性对照)放入离心管中,100℃煮沸10分钟,以12000 r/min离心10分钟,取上清液作为DNA模板。

3.2 PCR反应。

检测沙门氏菌的特异性PCR引物是P1:5 '-actggcgttatccctctctctcttggtg-3 ',p2:5 '-atgttgtctctcgctctggtaagaga-3 '。

3.3电泳分析。

取5μlPCR产物,直接在1%琼脂凝胶(含0.5 μ g/ml溴化乙锭)上电泳。观察凝胶成像仪中的结果并拍照。沙门氏菌的特异性条带为587bp,表面为沙门氏菌。

电泳分析结果

4药敏试验。

对k-b法进行药敏试验。将该菌株接种于血平板,贴药敏纸,37℃培养24h,观察结果。该菌株对庆大霉素、阿米卡星、氟苯尼考和诺氟沙星敏感。对头孢菌素、青霉素G钠、头孢曲松、诺氟沙星、呋喃唑酮、阿莫西林耐药。

5鹦鹉沙门氏菌的控制。

5.1鹦鹉沙门氏菌病的治疗。

OP诺氟沙星,10-20mg/kg体重,口服三次。

链霉素,每天100-200mg/kg体重,口服2-3次。

5.2预防鹦鹉沙门氏菌病。

(1)带菌鸟和健康鸟分开饲养。你不能把回收的鸟当作一种鸟来使用。

(2)鸟笼和鸟舍应经常消毒。0可用。1%过氧乙酸喷雾消毒,也可用5%漂白粉或84消毒液或5%烧碱对鸟笼周边环境进行消毒。

(3)雏鸡开始进食后服用预防药物。每日服呋喃唑酮10 mg/kg体重,口服3-4次,连用3天,连续使用不超过5天,避免中毒。

6讨论。

6.1我国已有沙门氏菌感染各种珍禽的报道,造成了巨大的经济损失。这只鹦鹉死得很快,临床上只出现血便,但从肝脏中分离出沙门氏菌,说明该菌已引起全身败血症和严重肠炎,符合该病的临床症状。

6.2沙门氏菌感染的症状有:幼鸟嗜睡、食欲不振、胎毛蓬乱、偏爱躲在暗处、颈部收缩、眼睛半闭、翅膀下垂、站立不动、腹泻。粪便起初是乳糜状的,然后变成白色。肛门周围的胎毛常沾有粪便,有时肛门被粪便堵塞。肛门沾有粪便的病鸡在排便时经常发出尖锐的呜呜声。此外,体温经常升高,呼吸困难,大多数人死亡。此外,根据鸟的种类,也有典型的疾病。比如灰鹦鹉容易患关节炎、肉芽肿性皮炎、蜂窝组织炎、腱鞘炎等慢性疾病。吸蜂蜜的鹦鹉死亡率更高。鹦鹉和金丝雀(细节)容易出现眼部症状。

在沙门氏菌的传统鉴定方法中,常规的鉴定介质分离和生化鉴定程序复杂且耗时长。全自动细菌鉴定仪鉴定成本高,操作复杂;沙门氏菌a ~ f多价0抗原的检测会因s-t-r突变而丢失正常的0抗原,不能被血清凝集或自凝,造成假阴性。该方法用于扩增沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列,特异性强、快速、简便、灵敏。由于检测细菌核酸,这种方法具有准确性高的优点。虽然这种方法已广泛应用于家畜和家禽,但首次将其用于检测鹦鹉沙门氏菌病。

目前,沙门氏菌的耐药性引起了人们的极大关注。耐药机制有多种,如灭活酶和灭活酶、改变药物作用靶点、通过生物膜耐药、通过外排泵耐药、甲基错配修复系统突变、移动基因元件耐药和耐药基因传播等。因此,药敏试验可以指导本病的治疗,避免盲目用药和耐药。该菌株的耐药谱相对较窄,为用药提供了更多的选择性。

沙门氏菌广泛存在于自然卷中,尤其是在污水、土壤和受感染动物的粪便中。无锡的六月和七月是雨季。另外,宠物主人刚从外地买的鹦鹉,免疫力下降。因此,快速分离鉴定细菌,结合药敏试验结果,合理预防用药,及时对鸡笼消毒,是避免鸟病的关键。

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